同乙個樣本兩次蛋白製樣有差異嗎

時間 2023-07-19 18:00:27

1樓:帳號已登出

有,在做蛋白提取實驗中,也許有的同學都會提出這樣的疑問:每次提蛋白後會將樣品在短時間內重複2-3次wb,但是每次跑出的條帶趨勢不一致,上樣量和其他條件都沒有變,內參基本是整齊穩定的,不知道為什麼目的條帶就是不一致?這是什麼原因呢?

影響因素太多了,實驗中的任何任何乙個步驟稍微有點差異都能產生不同的結果,下面簡單說三點,可以用作參考。

1.你蛋白的問題,雖然是同一批的,但是可能在蛋白表達與純化過程中難免會出現個別的異類;

2.你的操作流程,不管做什麼都會有誤差,不可能每次的做的都一樣,我們只能減少誤差,所以可能你覺得自己每次都做得一樣,但某個小細節你並沒有發現;

3.試劑,也許你的試劑已經不能用了,或者溶度不對了都會影響你的實驗。

做乙個實驗來說*原則就是,也許你這次做出來了下次就做不出來了,每次做的時候寫下來,不要嫌麻煩,這樣做錯了能省很多時間。

2樓:求致桃

會有差異。同乙個樣本兩次蛋白質樣是會有差異的。因為儀器檢測在不同的時間即使是同乙個樣本也不會完全一樣的,每次都會些差異,但是不會差太大。

可以將兩個獨立樣本分別與乙個相同的檢驗值比較來分析這兩個樣本是否有差異嗎

3樓:慕容修潔

不太明白你的意思。如果這倆個獨立的樣本可以和同乙個檢驗值比較,我覺得這倆個樣本之間就可以比較了,沒必要用乙個中間的檢驗值。。。

做差異分析的時候如果兩個組樣本量差太多,會有影響嗎?

4樓:一二三奈斯

影響是肯定有的,兩組樣本量一致,誤差會更小。不一致的話,軟體分析肯定會出結果,但有沒有意義。

1、差距分析是戰略分析方法之一。對企業制定的目標與企業預期可取得的結果進行比較,或者對企業制定的目標與企業實際取得的結果進行比較,分析兩者之間是否存在差距。若存在差距,進一步分析造成差距的原因並制定措施(如改變目標、改變戰略等)減少或消除差距。

差異化分析的作用:

1)差異分析指標可反映現象分布或發展的均衡性、穩定性和節奏性。一般來說,某現象所表現出來的差異越小,說明該現象分布或發展得越均衡;否則,該現象分布或發展得越不均衡。

(2)差異分析指標可說明平均指標的代表性大小。用平均指標來代表某種現象的一般水平時,其代表性的大小與總體各單位標誌值的差異程度有直接關係。一般說來,某一總體內部的差異越小,其平均數的代表性就越大;反之,其平均數的代表性就越小。

因此,在研究平均數的代表性時,差異分析就顯得非常重要了。

3)差異分析指標可以用來評價兩個總體或兩個個體之間的差距程度,以說明工作的好壞。

4)差異分析指標是科學地進行抽樣推斷、統計**應考慮的重要因素。

血清同工酶電泳與蛋白質電泳有何區別與聯絡

5樓:但寧洛雨

dna電泳一般使用的都是瓊脂糖凝膠電泳,電泳的驅動力靠dna骨架本身的負電荷。

蛋白質電泳(一般指sds-page)一般使用的都是聚丙烯醯胺凝膠電泳,電泳的驅動力靠與蛋白質結合的sds上所攜帶的負電荷。

所以相同點就是樣品都是帶負電荷的,從負極向正極移動,移動的距離都和樣品的分子量有關。而且這兩個電泳體系可以互相交換使用。進行大分子蛋白質電泳時,可以考慮換用瓊脂糖凝膠,因為該體系孔徑大。

相反,如果需要精確到各位數鹼基的dna電泳也可以使用聚丙烯醯胺凝膠系統,因為使用該系統可以將相差乙個鹼基的兩條dna鏈分開。

不同點首先是樣品不同。這個就不用多說了。其次是結果的觀察方法不同。

dna電泳普遍使用eb做染料,在紫外燈下觀察;而蛋白電泳使用的考馬斯亮藍染色,還需要經過脫色步驟,不過觀察起來比較簡單。還有就是膠體系的差別,dna電泳通常是一膠跑到底,而蛋白質電泳則會有分離膠和濃縮膠之區別。

先說這麼多,有不明白的你再問好了~

回答補充:電泳中樣品移動的本質確實是樣品所攜帶的電荷。但是,區分這些條帶直接可以用分子量而無需使用電荷數,是因為這些樣品的電荷/分子量比都是恆定的了。以dna分子為例,它在電泳中的移動是靠其骨架中磷酸所攜帶的負電荷來實現的,而這個磷酸分子又是每乙個核苷酸中都有的,所以dna分子所攜帶的負電荷數是由其核苷酸總數決定的。

而且,dna分子中核苷酸的組成動輒成百上千,在如此大的分子量面前,討論單個核苷酸之間分子量的差別就顯得毫無意義。這樣,dna分子中負電荷的量就可以用dna的分子量來代替,反過來,dna的分子量也就可以用dna分子所攜帶的電荷來代替(一句話,dna分子的電荷/分子量比是恆定的)。

這在蛋白電泳中(特別是sds-page中)是一樣的。在sds-page中,sds將蛋白質變性成直線分子並緊密包裹於其上,使得其所攜帶的電荷與蛋白分子量成了一定的比例,剩下的就和核酸電泳一樣了。

至於為什麼核酸的橫著跑,蛋白豎著跑,個人認為最大的問題是蛋白制膠的過程導致的。蛋白制膠由於使用了兩種不同的凝膠系統,所以需要乙個水平的分介面。這個分介面在配膠的過程中是依靠異丙醇在重力作用下的壓力下形成的。

所以,一併就豎著跑了~~

6樓:賴寄竹孛午

首先,同工酶電泳本質上就是蛋白質電泳,和普通蛋白質電泳一樣是利用蛋白質分子的電性,粒子大小等特性將不同種類蛋白分離。

區別在於,同工酶電泳因為電泳的是酶,可以利用酶催化底物反應的原理在電泳結束後進行染色,在染色液中加入底物和酶活性所需的因子,通過酶促反應生成有色物,顯示酶帶。

而普通的蛋白電泳染色只能靠考馬斯亮藍之類通用的染料顯現條帶。

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