關於某雙縮脲反應

時間 2022-09-23 13:25:48

1樓:匿名使用者

雙縮脲反應的原理雙縮脲(nh2-co-nh-co-nh2)在鹼性溶液中可與銅離子產生紫紅色的絡合物,這一反應稱為雙縮脲反應

雙縮脲反應主要涉及肽鍵、尿素中含有類似肽鍵的結構、可與銅離子產生紫紅色的絡合物

2樓:匿名使用者

雙縮尿 與 蛋白質 呈紫色!

3樓:匿名使用者

雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為氨基酸所沒有的乙個顏色反應。一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:-co-nh-)的化合物與鹼性銅溶液作用,形成紫色或藍紫色複合物,利用這個反應借助分光光度計可以測定蛋白質的含量。

雙縮脲試劑有naoh和cuso4配製而成,必須當場配製當場使用。

雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑a和雙縮脲試劑b兩種試劑組成。雙縮脲試劑a的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/ml的水溶液;雙縮脲試劑b的成分是硫酸銅的質量分數為0.

01 g/ml的水溶液。雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。

具體方法是:

先將雙縮脲試劑a加入組織樣液,搖盪均勻(必須營造鹼性環境),在加入雙縮脲試劑b,搖盪均勻。如果組織裡含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。

蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

雙縮脲(nh2conhconh2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出乙個分子氨後得到的產物。

雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-conh-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色。

4樓:匿名使用者

斐林試劑和雙縮脲試劑的成分相同,但二者的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。

1. 斐林試劑和雙縮脲試劑

斐林試劑和雙縮脲試劑都由溶液和溶液組成,但二者有如下三點不同:

(1)溶液濃度不同

斐林試劑中溶液稱為斐林試劑甲,其濃度為溶液稱為斐林試劑乙,其濃度為;雙縮脲試劑中溶液(雙縮脲試劑a)的濃度為,溶液(雙縮脲試劑b)的濃度為。

(2)使用原理不同

斐林試劑是新配製的溶液,它在加熱條件下與醛基反應,被還原成磚紅色的沉澱,可用於鑑定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑑定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為:淺藍色→棕色→磚紅色(沉澱)。

鑑定生物組織中是否含有蛋白質時,常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在鹼性環境下的與雙縮脲試劑發生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲()結構相似的肽鍵,所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發生顏色反應,可以用雙縮脲試劑鑑定蛋白質的存在。

(3)使用方法不同

斐林試劑使用時,先反溶液和溶液混合(將滴溶液滴入溶液中),而後立即使用:雙縮脲試劑使用時,先加入溶液(2ml),振盪搖勻,造成鹼性的反應環境,然後再加入3~4滴溶液,振盪搖勻後觀察現象。

2. 斐林試劑和班氏試劑

關於斐林試劑和班氏試劑,可用下面的例題引出其異同點:例:你可用什麼方法,檢驗人的尿液中是否含有糖?

答案:方法一:在試管中加入人的尿液0.

1ml,加入班氏糖定性試劑1ml,混合均勻後,將試管放入盛有開水的燒杯中,加熱煮沸1min~2min,若試管中溶液在加熱後產生了磚紅色沉澱,說明尿液中含有糖。

方法二:取少許尿液加水稀釋後,加入剛配製好的斐林試劑,沸水浴加熱後,若出現磚紅色沉澱,則說明尿液中含有糖。

方法三:取少許尿液加水稀釋後,加入少許懸濁液(新制)加熱,若出現磚紅色沉澱,則說明尿液中含有糖。

因斐林試劑實質上是新配製的溶液,所以方法二與方法三的實質是相同的,只是說法不同而已。

由以上例題可以看出,斐林試劑和班氏試劑都能用於鑑定可溶性還原糖(上題中檢驗的是葡萄糖)的存在,二者有相同點,也有不同點。

二者的不同點,可以歸納為以下幾點:

(1)班氏試劑常用於尿糖的鑑定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:

①400ml水中加85g檸檬鈉和50g無水碳酸鈉;

②50ml加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。製成溶液;

③把溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產生沉澱可濾去。

(2)其反應原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑑定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應生成和可溶性還原糖反應產生磚紅色沉澱。而班氏試劑中的產生卻是這樣的:

檸檬酸鈉和碳酸鈉均為強鹼弱酸鹽,在水中它們均可水解產生,與檸檬酸鈉溶液和溶液混合時,結合,生成與葡萄糖中的醛基反應生成磚紅色沉澱。

(3)兩種試劑的儲存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙可強烈產生,很容易沉澱析出,因此斐林試劑一般為現用現配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉為一對緩衝物質,產生的數量有限,與溶液混合後產生的濃度相對較低,不易析出,因此該試劑可長期儲存。

當然,無論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結底都是與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉澱,兩者反應現象一樣,這就是二者的相同之處。