質粒為什麼不能轉錄,質粒轉染細胞為什麼不表達,求助

時間 2022-04-20 15:35:02

1樓:累得像豬一樣

質粒都是帶有1個或多個啟動子的,用於篩選或者報告基因表達。

但這些基因是否會轉錄,進而表達蛋白,是受到調控或者條件限制的,如抗性基因必須是在培養時有抗性壓力(如培養基中新增抗生素)時,才得到轉錄和表達,如果沒加抗生素,就只會有極少的洩露表達(也可認為是沒表達);常見的lacz啟動子,也需要有iptg誘導,才會得以轉錄。

簡而言之,工程質粒都是有轉錄能力的,但如果開關沒開啟,就不會開啟轉錄。

2樓:養你過年吃肉

一般的工程質粒都是帶有1個或多個啟動子的,用於篩選或者報告基因表達。

但這些基因是否會轉錄,進而表達蛋白,是受到調控或者條件限制的,如抗性基因必須是在培養時有抗性壓力(如培養基中新增抗生素)時,才得到轉錄和表達,如果沒加抗生素,就只會有極少的洩露表達(也可認為是沒表達);常見的lacz啟動子,也需要有iptg誘導,才會得以轉錄。

簡而言之,工程質粒都是有轉錄能力的,但如果開關沒開啟,就不會開啟轉錄。

個人見解,僅供參考,祝愉快!

質粒轉染細胞為什麼不表達,求助

3樓:義翹神州加油

原因有很多可能:

質粒上的目的基因被宿主系統破壞;版

目的基因對應蛋白對細胞有毒害權作用,被細胞反饋調節到抑制表達;

目的基因表達與細胞本身特點能力不符;

質粒載體選擇與表達系統不合適;

檢測方法有問題,有表達,但是沒有檢測出來;……

4樓:牧銳衡同方

博凌科為解答:copy個人感覺bai不能憑沒有條帶就斷du定細胞沒有表達蛋

白,因為zhi跨膜蛋白本身就dao

是比較難提取的蛋白,再加上你的抗體不一定起作用,這些都要考慮進去的吧。建議先檢測或細胞有沒有表達你要的蛋白,就在轉染後48h加入一抗(適用於facs那種的抗體),然後再加入帶螢光標記的二抗;如果你能買到直接帶螢光標記的一抗也非常好。先檢測活細胞是否表達了你的蛋白。

然後再做決定。

質粒是如何進行複製的? 5

5樓:

質粒是染色體外能夠進行自主複製的遺傳單位,包括真核生物的細胞器和細菌細胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(dna)分子.現在習慣上用來專指細菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體以外的dna分子.在基因工程中質粒常被用做基因的載體.

因此,人的細胞中沒有質粒 每個細胞中的質粒數主要決定於質粒本身的複製特性.按照複製性質,可以把質粒分為兩類:一類是嚴緊型質粒,當細胞染色體複製一次時,質粒也複製一次,每個細胞內只有1~2個質粒;另一類是鬆弛型質粒,當染色體複製停止後仍然能繼續複製,每乙個細胞內一般有20個左右質粒.

一般分子量較大的質粒屬嚴緊型.分子量較小的質粒屬鬆弛型.質粒的複製有時和它們的宿主細胞有關,某些質粒在大腸桿菌內的複製屬嚴緊型,而在變形桿菌內則屬鬆弛型.

cole1質粒dna的複製,是從乙個特定的複製起點(ori)開始,並沿著環dna分子單向性地進行.控制此種質粒dna複製啟動的兩種關鍵因素rnai和rnaⅱ兩種rna分子,都是由cole1 dna轉錄產生的.其中rnaⅱ也叫做複製引物.

rnaⅱ分子在轉錄起點附近同互補的模板dna形成一種雜交分子,被rnaseh酶所切割,從而釋放出3′-oh末端,作為供dna聚合酶ⅰ合成dna的引物.rnaⅰ可以通過同rnaⅱ結合,以阻止其與模板dna發生雜交作用.

在基因工程麗為什麼一定要用質粒匯入目的基因?不能直接匯入嗎、

6樓:匿名使用者

我們匯入目的基來因不是根本的目的自,而是希

bai望它匯入後能夠跟du隨細胞繁殖表達。你是把目的基zhi因匯入了dao,但是它可能不具有生物的活性(不能複製或表達),無法和寄主細胞真正建立聯絡。但是可以借助質粒啟用它的活性,使他能跟隨細胞繁衍表達

去年高考結束的,現在都有點忘了,希望我的解釋你能理解,同學加油 ~

7樓:匿名使用者

不一定要有質粒的,還可以用病毒。

使用質粒和腺病毒,可以直接表達。更重要的回一點是,通答過控制質粒上的序列,可以使基因整合到細胞的基因組中間。或者通過質粒上的啟動子來調控該基因的表達。

這些都是單純的編碼序列所沒有的功能。

樓上說的不對,質粒在真核細胞內是不能複製的。

rnai的短鏈序列可以直接匯入發揮作用。但不是用來表達蛋白。

8樓:summer盛夏陽光

不能表達,直接匯入沒有自我複製功能,更不能轉錄!

質粒中含啟動子,你先把質粒的功能結構了解清楚了就明白為什麼不能直接匯入了。

9樓:拾貝

因為質粒上有啟動子終止子,這樣就可以自我複製,直接匯入就不行了

為什麼質粒可作用基因載體,質粒為什麼可以作為基因工程的載體

四個條件 1.質粒是環狀dna分子 cdna 可以游離於細胞質中,並穩定的存在。2.質粒的複製不受細胞核基因的干擾,自主的複製。3.質粒上面有多個限制性內切酶位點,可以攜帶多種dn 段。4.帶有某些標記基因,倒入成功後,便於我們檢測出來。 小漁兒 從簡單回答,1,質粒是dna鏈 可以在細胞內 複製。...

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