如何選擇抗體,如何選擇二抗

時間 2022-11-24 16:50:50

1樓:充初夏侯

抗體的選擇

作為western來講,理論上單抗比多抗的特異性要好,但單抗種類較少一般**偏高,所以一般來說多抗足夠了。用於western的抗體和用於elisa的抗體,一 般來說用於western的抗體識別的是氨基酸序列特異性;而可用於elisa的抗體則要看抗原種類,有些是識別氨基酸序列特異性,有些是識別構像特異性。所以一-般根據抗體說明書來確定。

做免疫印跡時選擇抗體主要應考慮兩個問題,一是所選抗體是否能識別凝膠電泳後轉印至膜上的變性蛋白,另乙個是所選抗體是否會引起交叉反應條帶。

覺得單抗和多抗**上差異與其處理方式有很大關係,可以仔細諮詢一下銷售 商。

2樓:匿名使用者

首先要分析試驗的應用型別,一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用於何種分析型別,比如可以應用於wb,ihc,icc 或者是 elasa 分析等

其次是分析樣本蛋白的結構性質,看待測樣本蛋白的結構域以及提取或處理過程等

最後就是具體看樣品的種屬,抗體宿主的種類,螢光和化學發光標記等等

3樓:科研達人

如何選擇抗體具體的要根據設計的實驗要求來,根據自己實驗需求來選擇,可以去專業的抗體製備公司諮詢一下,如:abcam、abclonal、santa等等。

如何選擇二抗

流式抗體如何選擇?

4樓:糟油酒丸

第一看清楚抗的是你的目標蛋白質沒錯,目標蛋白的物種不要搞錯了,有些抗體對好幾個物種的目標蛋白有反應,對你的實驗有沒有影響。

第二抗體的物種是小鼠,大鼠,兔子還是什麼。雖然現在螢光都標記好了,一般不需要二抗。但最好還是選擇你有匹配二抗的一抗,以備不時之需。

如果抗體還能夠做螢光染色啊,western blot啊用途多了更好。

第三螢光的顏色選擇一是你的流式儀一定要能讀,二是跟你需要counterstain的其他流式抗體錯開頻率。

第四抗體的球蛋白亞型。因為要根據這個選擇isotype對照用抗體。其實嚴格來說不光亞型一樣,濃度也要一樣,每個抗體分子攜帶的螢光分子數量也要一樣才行。

最好是乙個isotype你的好幾個抗體都能用,就省了事了。

第五到底能測試多少樣品。有些產品介紹沒說清楚,可以根據推薦的濃度計算一下。一是這樣才看出**高低,二是根據自己需要選擇大支還是小支.買多了過期也是浪費。

當然也可以看看他們的轉殖編號--有些文獻會討論某目標蛋白的各種抗體的特異性哪個好哪個壞,這都是使用者的經驗。但一般買抗體沒有人這麼小心這麼麻煩啦。

你還可以看製作抗體所用的抗原是什麼,有的是腫瘤組織提取液,有的是重組蛋白,有的是肽鏈片斷。選用哪個跟你的實驗用途有關。有些蛋白質有很多亞型,也要注意是否測試過跟那些亞型起反應。

乙個非常重要的忘記說,就是單抗還是多抗。也要根據實驗性質選擇。搜到一篇不錯的文章談這個問題你看下吧。

請教如何選擇western的抗體

5樓:匿名使用者

抗體復選擇一般注意幾點:

制1、特異性(特異bai性高較好,一般單抗優du於多抗,但有時你想貼出

zhi同一蛋白不同加

dao工形態,多抗能貼出所有帶,根據實驗選擇)2、效價(效價高)3、知名抗體公司,如cst、abcam、thermo等

6樓:科研達人

選擇抗體首先要根據自己的實驗需求來進行適合的選擇,然後要看選著抗體的特異性、效價、濃度比等等,口碑比較好的公司,如abcam、abclonal、santa等。

抗體可以分為哪些型別?如何選擇合適的抗體?

7樓:匿名使用者

至今為止,應用於臨床的常用抗體有幾十種,在這當中又可分為兩種型別。

1.濃縮型抗體

根據近幾年來使用的情況認為,它有許多優點,但也有許多不足之處:

①可作為各種疾病檢測的常備抗體。在各單位的常規活檢診斷中,有常見的病例,也有罕見的病例,尤其是後者,有時很長時間才遇到一例,這就給抗體的應用和備用提出了更高的要求,如除了常用的抗體外,還需備用一些較為罕見病例的抗體。這樣才能解決臨床的診斷問題,如臨時購買,則需較長的時間,這樣就會延誤診斷。

實踐證明:濃縮型抗體,可作為常備檢測抗體。當購買抗體後,根據檢測病例的數量,在無菌的條件下,將抗體分成小包裝,然後用蠟膜封起來,於-30℃的低溫冰箱中儲存,臨用時取出一支,用指溫促其回公升至室溫,然後用pbs稀釋即可使用,這種抗體可儲存3年左右。

②成本低,**較便宜。

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詳細資料請參考:

抗體

如何選擇實驗抗體

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