凋亡細胞的原位組織末端轉移酶組織切片經水化後標記

1樓：瓜江一等

bam7是一種直接的，選擇性的是凋亡相關bax的激動劑，為 μm。

靶點： bax

ic50： μm (ec50)

體外研究： bam7直接結合到bax的n-末端的bh3結構結合溝。bam7直接在表面與bax相互作用，通過bim bh3螺旋，觸發bax啟用。

bam7導致功能性bax啟用。bam7觸發bax從單體到低聚物的轉換，這種作用存在劑量和時間性，bax：bam7的動力學接近飽和1:

8劑量比。在體外，bam7觸發bax低聚化，bax-介導的孔形成，及bax-依賴的細胞死亡。bam7通過觸發細胞內bax啟用而選擇性誘導bax-介導的細胞凋亡。

bam7只殺死含bax的細胞系，產生bax-介導的細胞凋亡的生化和形態特徵。[1]

特徵： bam7不與抗凋亡蛋白或促凋亡的bak的bh3結合袋相互作用，且誘導bax依賴性的細胞死亡。

什麼方法最快檢驗出死亡細胞的數目

2樓：弓昱

台盼藍(trypan blue)是檢測細胞膜完整性最常用的生物染色試劑。健康的正常細胞能夠排斥台盼藍，而死亡的細胞，膜的完整性喪失，通透性增加，細胞可被臺盼藍染成藍色。依據此原理，細胞經台盼藍染色後，可通過顯微鏡，直接鏡下計數或拍照後計數，實現對細胞存活率比較精確的定量分析。

tunel 試劑盒細胞與組織切片的有區別嗎

3樓：南京金益柏生物科技****

tunel法可以通過原位標記dna斷裂端從而標記凋亡細胞，因此特別適用於組織凋亡研究，是目前研究組織體內細胞凋亡最廣泛採用的手段。同時由於其原理是基於檢測早期基因組的斷裂，因此可以檢測到很早期的細胞凋亡，且能通過標記的多少，進行半定量研究。

tunel的缺點是：

1），操作要求高，組織樣本需要固定（即使是培養細胞，也需要固定），不恰當的固定方法對實驗結果影響很大，導致背景過高或者訊號過弱，因此實驗結果重複性不好；有的人花上半年做乙個體內的tunel是一點都不奇怪的。

2），大部分誘導凋亡的藥物也引起dna損傷，從而產生dna斷裂，易引入假陽性；

3）凋亡晚期細胞基因組大量降解，導致tunel標記反而減少，因此此法反應的是早期凋亡比例，不能嚴格反應凋亡比例，屬於半定量研究。

儘管有如此多缺點，但由於其是目前為數不多的能原位標記凋亡細胞的方法，因此用於組織體內凋亡研究仍然是首選。但體外細胞實驗研究，很少用此法。

凋亡檢測中，tunel並不是過時的方法，現在研究凋亡的文獻仍然常見。而且相反，還比以前多一點，因為現在體內實驗越來越多了，甚至線蟲的凋亡研究，都用tunel。

凋亡研究中，的確有幾種方法過時了，當然是因為有替代方案了，比如dna ladder，電鏡。

回到lz的原帖，的確如大家所言，做貼壁細胞，不推薦用tunel。如果是經典凋亡途徑，只是確定比例，用最經典，最常用的subg1法即可，如果是不確定是否是凋亡，用annexin v，不過貼壁細胞用此法，要注意消化時間。

細胞凋亡的免疫學檢測方法有哪幾種（注意是免疫學的方法） 30

4樓：北戴河的漁

使用抗組蛋白和抗dna的單轉殖抗體酶聯免疫分析可以測得細胞凋亡形成的一種特殊複合物－－細胞凋亡時，細胞內dna降解形成的核小體dna可與核心組蛋白質h2a、h2b、h3、h4緊密結合形成的。

此法可定量、定性，但不能定位。