1樓：熱愛影視者
儀器1. 淨化工作台2. 離心機3. 恆溫水浴箱4. 冰箱（4℃、-20℃、-70℃）5. 倒置相差顯微鏡6. 培養箱7. 液氮冰箱
玻璃器皿1. 吸管（彎頭、直頭）2. 培養瓶3. 玻璃瓶（250ml、100ml）4. 廢液缸。
塑料器皿1. 吸頭2. 槍頭3. 膠塞4. 移液管（10ml）5. 15ml離心管6. 凍存管（1～2ml）。
其他物品1. 微量加樣槍2. 紅血球計數板3.
記號筆4. 醫用橡皮膏5. 移液槍（五）試劑1.
d-hanks液2. 小牛血清3. 培養液4.
雙抗（青黴素、鏈黴素）5. 胰蛋白酶（0.08%）6.
1nhcl7. 7.4%nahco38.
dmso（分析純）或無色新鮮甘油。
細胞凍存1. 配製含10%dmso或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來，懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中；
3. 離心1000rpm，5min；
4. 去除胰蛋白酶及舊的培養液，加入適量配製好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
5. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
6. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
7. 凍存：標準的凍存程式為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。
也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然後放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
2樓：天蠍的心馳神往
冷存管置於4℃10分鐘----20℃30分鐘----80℃16～18小時(或隔夜)---液氮槽vaporphase長期儲存。-20℃不可超過1h，以防止胞內冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
3樓：北京索萊寶科技****
細胞凍存
1. 配製含10%dmso或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用pbs清洗。
3. 去除pbs，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入適量配製好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程式為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。
也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然後放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
細胞凍存融化怎樣操作?為什麼?
4樓：隋小魯霽
細胞凍存融化的原則是緩凍速融
細胞凍存（慢）
1.預先配製凍存液：10 % dmso + 90%胎牛血清,4℃冰箱儲存預冷；
2.用胰酶對細胞進行消化：倒去培養瓶中的培養基或用槍小心吸去培養板中的培養基,pbs沖洗兩次,用胰酶消化細胞（盡可能溫和）；
3.將預冷的凍存液懸浮細胞,用滴管輕輕吹打混勻.
4.在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封後標記凍存細胞名稱和凍存日期.
5.凍存步驟的細緻直接關係到細胞復甦時的活力,如果有程式降溫器（放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐）最好；或者可以在4℃,2h；然後轉到-20℃,2h；-80℃,2h；放入液氮罐.
細胞凍存管融化（快）
1.將細胞凍存管取出,浸入37℃水浴鍋內,輕輕晃動,注意融化,當融得只剩乙個小冰塊時,將細胞插入冰中.
2.加入4℃預冷的培養基,用手指輕彈懸浮細胞團.
3.250g離心10min,去除上清液,再加入培養基,輕輕懸浮.
4.盡量將細胞中的dmso洗去,計數.
在細胞凍存過程中,所結的冰晶對細胞傷害較大,所以過程一定要慢,dmso能減少冰晶傷害.
在細胞復甦過程中,要快,以減少融化對細胞的傷害,其實還是冰晶的問題.dmso浸潤的細胞非常脆弱,所以可要盡快將dmso去除,一定要輕.
求助：貼壁細胞的凍存和復甦的具體步驟
5樓：魚骨頭愛游泳
凍存：吸去培養基-pbs洗-胰酶消化-加培養基終止消化-離心-凍存液重懸（可以直接放入-80過夜然後放入液氮）
復甦：用培養基直接吹打凍存管裡的細胞快速融化-離心-培養基重懸-移到培養瓶或皿中-晃勻-培養
細胞凍存的操作步驟
6樓：小海
（一）儀器
1. 淨化工作台
2. 離心機
3. 恆溫水浴箱
4. 冰箱（4℃、-20℃、-70℃）
5. 倒置相差顯微鏡
6. 培養箱
7. 液氮冰箱
（二）玻璃器皿
1. 吸管（彎頭、直頭）
2. 培養瓶
3. 玻璃瓶（250ml、100ml）
4. 廢液缸
（三）塑料器皿
1. 吸頭
2. 槍頭
3. 膠塞
4. 移液管（10ml）
5. 15ml離心管
6. 凍存管（1～2ml）
（四）其他物品
1. 微量加樣槍
2. 紅血球計數板
3. 記號筆
4. 醫用橡皮膏
5. 移液槍
（五）試劑
1. d-hanks液
2. 小牛血清
3. 培養液
4. 雙抗（青黴素、鏈黴素）
5. 胰蛋白酶（0.08%）
6. 1nhcl
7. 7.4%nahco3
8. dmso（分析純）或無色新鮮甘油 （一）細胞凍存
1. 配製含10%dmso或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，用胰蛋白酶把單層生長的細胞消化下來，懸浮生長的細胞則直接將細胞移至15ml離心管中；
3. 離心1000rpm，5min；
4. 去除胰蛋白酶及舊的培養液，加入適量配製好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
5. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
6. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
7. 凍存：標準的凍存程式為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。
也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然後放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
（二） 細胞復甦
1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，並不時搖動令其盡快融化。
2. 從37℃水浴中取出凍存管，開啟蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管並滴加10倍以上培養液，混勻；
3. 離心， 1000rpm，5min；
4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養液重懸細胞，計數，調整細胞密度，接種培養瓶，37℃培養箱靜置培養；
5. 次日更換一次培養液，繼續培養。 1．從增殖期到形成緻密的單層細胞以前的培養細胞都可以用於凍存，但最好為對數生長期細胞。在凍存前一天最好換一次培養液；
2．將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免凍傷；
3．凍存和復甦最好用新配製的培養液。
7樓：混f吃
1. 配製含10%dmso或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2. 取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用pbs清洗。
3. 去除pbs，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4. 離心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入適量配製好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6. 將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8. 凍存：標準的凍存程式為降溫速率-1～-2℃/ min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。
也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然後放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
細胞凍存管融化
1.將細胞凍存管取出，浸入37℃水浴鍋內，輕輕晃動，注意融化，當融得只剩乙個小冰塊時，將細胞插入冰中。
2.加入4℃預冷的培養基，用手指輕彈懸浮細胞團。
3.250g離心10min，去除上清液，再加入培養基，輕輕懸浮。
4.盡量將細胞中的dmso洗去，計數。
在細胞凍存過程中，所結的冰晶對細胞傷害較大，所以過程一定要慢，dmso能減少冰晶傷害。在細胞復甦過程中，要快，以減少融化對細胞的傷害，其實還是冰晶的問題。dmso浸潤的細胞非常脆弱，所以可要盡快將dmso去除，一定要輕。
白細胞低紅細胞低是什麼情況，白細胞低紅細胞低是什麼情況
白細胞低，紅細胞低 建議即到正規醫院血液科西醫作相應的檢查 排除骨髓疾病 骨髓 再生不良症，白血病 骨髓瘤及轉移癌浸潤 病毒感染，脾亢進，藥物中毒等病。明確 因病施治。白細胞低和紅細胞低是什麼原因 引起白細胞減少原因 藥物因素 能引起白細胞減少的藥物很多,主要有抗癌藥,氯黴素,磺胺類消炎藥止痛片,糖...
白細胞是什麼，什麼是白細胞？
白細胞是沒有顏色的。白細胞舊稱白血球。血液中的一類細胞。白細胞也通常被稱為免疫細胞。白細胞舊稱白血球。血液中的一類細胞。白細胞也通常被稱為免疫細胞。白細胞無色呈球形，有細胞核，體積比紅細胞大，直徑在7 20 m之間。正常人白細胞計數在4000 10000 mm3範圍內，平均為7000 mm3。血塗片...
幹細胞是什麼，什麼是幹細胞？
您好 幹細胞移植技術作為一種新的科學技術，為一些疑難雜症的 帶來了希望。主要是把健康的幹細胞移植到患者體內，以達到修復或替換受損細胞或組織，從而達到 的目的。幹細胞 範圍很廣，一般在兩性生殖抗衰 慢病 糖尿病 高血壓 心臟病等 神經系統疾病 免疫系統疾病 還有其他的一些內外科疾病。幹細胞在醫學界被稱...
幹細胞是什麼，什麼是幹細胞？
我們人體是由40萬億到60萬億個細胞所組成，共230多種，分為功能細胞和幹細胞兩大類。第一類是功能細胞，人體的各種各樣的生理活動就是這些細胞生命活動的體現。比如，心臟就是由心肌細胞構成的，它們有節律的收縮和舒張完成了心臟的生理功能 人的思維，也正是由大腦中的神經元細胞相互傳遞資訊來完成。可以說，正是...
再生細胞剝離是什麼，什麼叫再生細胞剝離？
細胞剝離是網上流行的細胞剝離美容術。基本原理 利用水動力軟性剝離細胞 達到抗衰去皺紋的效果，從原理上看安全問題不大，生理鹽水作為剝離的介質。您好，感謝你的提問，再生細胞剝離這是近幾年興起的一種，抗衰祛皺技術，美容圈內又稱為，水剝離技術，細胞剝離技術等。這個我做過，是水剝離吧，我做了三次，祛法令紋，現...